酶聯免疫分析試劑盒基本原理是利用抗原抗體反應的特異性，通過將待測物與酶連接，然后酶與底物產生顏色反應，其所生成的顏色深淺與待測抗原（或抗體）的含量成正比。這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計（酶標儀）加以測定。由于ELISA是基于抗原抗體反應的特異性，這意味著該種方法的測定對象既可為抗原也可為抗體：當被分析樣本為抗原時，檢測試劑可針對該種抗原產生特異性的抗體；當被分析樣本為抗體時，則其目標抗原可用作結合的試劑。